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電動組織勻漿器組織勻漿方法

發(fā)布時間：2018-02-26 閱讀：1530次

采用微型直流馬達驅(qū)動研磨杵工作，研磨微量組織，時間短見效快。研磨杵重量輕，適合多種滅茵方式，可重復使用，拆卸方便。是專門為各種高水分、高蛋白、高纖維樣品的勻漿和均質(zhì)而特制的。主要的應用有：牧草/干食品/化學物質(zhì)的切碎。肉/魚/水果/蔬菜/預制食品（如比薩、凍肉）/化學物質(zhì)/醫(yī)藥的均質(zhì)。
可以在很短的時間內(nèi)處理好冷動的樣品，適用于檢測不穩(wěn)定的分析成分如維生素等。電動組織勻漿器組織勻漿方法如下：
勻漿肝每50mg加（裂解液）0.5mlRIPA和5ULPMSF（不能預先加入，否則失效）電動勻漿。
注意保持低溫（埋在冰中），快速勻漿。
將樣品轉(zhuǎn)移到1.5ml離心管中，12000g離心，4℃，2-3min。
取少量上清進行考馬斯亮蘭595nm定量。
將所有蛋白樣品調(diào)至等濃度（用裂解液），加loading buffer后，分成等體積的兩部分（分別于-20℃、-70℃儲存）。
每次上樣前加熱98℃，5min。 (提取磷酸化的蛋白還需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM)。
gel通常在0.5-1h內(nèi)凝集，過快表示TEMED、APS用量過多，此時膠太硬易龜裂，而且電泳時容易燒膠。
太慢則說明兩種試劑用量不夠或者系統(tǒng)實際不純或?qū)嵭А?br />

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