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非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測過程中需注意的事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間：2019-03-06 閱讀：1337次

非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起豬的一種急性、熱性、高度接觸性動物傳染病，臨床上以高熱、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血和高死亡率為特征，易感豬群的病死率高達(dá)。動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為法定報(bào)告動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。而且，非洲豬瘟病毒也是《禁止生物武器公約》清單中列入的核查動物病原體。目前，針對非洲豬瘟防控，尚無有效的商品化疫苗，防控重點(diǎn)是做好生物安全管理和早期診斷撲殺凈化。非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀在整個檢測過程中發(fā)揮著重要的作用。
為了確保結(jié)果準(zhǔn)確性，儀器的使用方法一定要正確。所用到的試劑盒的操作，也是不能馬虎的，下面，我們來看看非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀檢測過程中需注意的事項(xiàng)。
整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

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