| Kary Mullis博士也許并沒有想到，他的PCR技術能夠在未來三十年保持長盛不衰。這不僅要歸功于DNA聚合酶的發(fā)展，也要歸功于PCR儀的不斷升級。如今，反應效率提高，反應體積減少，使得PCR逐漸應用在廣泛的領域。選購PCR儀，似乎并不是一件難事。然而，對于一些關鍵的參數(shù)，你真的了解它們的意義嗎？
現(xiàn)在，快速PCR已成為一種潮流。反應時間從90分鐘縮短到30分鐘，是受歡迎的，畢竟誰也不想在預約PCR儀時排隊等太久。溫度循環(huán)是所有PCR的基礎。儀器的變溫速率將決定PCR運行的整體速度。毫無疑問，變溫越快，PCR運行也越快。宣傳資料往往也會先展示高變溫速率以暗示PCR儀運行速度快。因此，在拿到參數(shù)表時，我們時間會留意變溫速率，也就是升降溫速率。
不過，如果大家留心看，通常會發(fā)現(xiàn)ramp rate前面還會有一個Max，這說明制造商公布的是大變溫速率。大模塊變溫速率（maximum block ramp rate）表示模塊變溫速率的限峰值。在PCR運行過程中，上述大性能只在短的時間內可達到，那種掐著秒表來計算變溫速率的方法是不可取的。因此有誠意的制造商還會公布平均模塊變溫速率（average block ramp rate），表示在較長的變溫范圍內溫度變化的速率。這個參數(shù)沒那么炫目，但具參考意義，具有比較價值。
當然，樣品的變溫速率可沒有模塊那么高。這就好比在爐子上燒水，爐子很快就達到100ºC以上，但水可能只有50ºC。模塊的熱量傳遞到樣品還需要一定的滯后時間。因此，只根據(jù)模塊溫度編程而不考慮樣品體積的變溫速率并不能算準確。
Applied Biosystems在這一點上就很周道，提供了另一種參數(shù)，平均樣本變溫速率(average sample ramp rate)或者大樣品變溫速率（maximum sample ramp rate）。這個參數(shù)能反應儀器根據(jù)體積來控制樣品達到設置溫度、遵循預設的實驗方案運行的真實能力，有效地評估PCR儀的真實性能。 |
